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核酸酶Cas12a
核酸酶、Cas12a、CPF1
价格:江西智飞生物有限公司
货号:2025-08-05
规格:
数量:18136440844
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详细介绍

Cas12a,也称Cpf1,是江西智飞生物自主研发的大肠杆菌表达平台表达的一种由RNA引导的可编辑DNA的重组核酸内切酶,带BMP+HIS双标签,分子量大约200kDa,基因编辑效率高,脱靶效率低的优点。

CRISPR-Cas系统作为原核生物的适应性免疫系统,广泛存在于细菌和古细菌中,能够保护其自身不受外源DNA或RNA的影响,是非常常用的基因编辑工具。完整的CRISPR-Cas系统包括介导识别DNA的CRISPR RNAs (crRNAs)和介导切割DNA的Cas核酸内切酶。

CRISPR-Cas12a系统是由Cas12a和gRNA (crRNA,仅需约40-44个碱基)组成。FnCas12a由gRNA引导至互补链,识别互补链上5'端短的富含T碱基(5'-TTN-3')的PAM (Protospacer adjacent motif)序列,然后FnCas12a中的RuvC核酸内切酶结构域逐个切割互补链和靶链,以产生交错的DNA双链断裂,断裂发生在PAM序列3'端的约第18个碱基处,切割产物为5'端突出4或5个碱基的粘性末端(图1)。而CRISPR-Cas9系统是由Cas9和gRNA (crRNA和tracrRNA两个RNA分子融合而成)组成,Cas9在gRNA的引导下,识别3'端富含G碱基(5'-NGG-3')的PAM序列,并且Cas9需要使用HNH和RuvC两个核酸酶结构域协同切割DNA,断裂通常发生在PAM序列5'端的第3个碱基处,最终产生平末端。

Cas12a核酸酶序列识别与DNA切割示意图。